Tswett, M. «Physikalisch-chemische Studien über das Chlorophyll. Die Adsorptionen». Berichte der Deutschen Botanischen Gesellschaft, 24, 1906, pàg. 316–323. DOI: 10.1111/j.1438-8677.1906.tb06524.x.. On page 322, Tsvet coins the term "chromatography":
Original : "Wird eine petrolätherishe Chlorophyllösung durch eine Säule eines Adsorptionsmittels durchfiltriert (ich verwende hauptsächlich Calciumcarbonate, welches in engen Glasröhren dicht gestampft wird), so werden die Farbstoffe gemäss der Adsorptionsreihe von oben nach unten in verschieden gefärbten Zonen auseinandergelegt, indem die stärker adsorbierten Farbstoffe die schwächer zurückgehaltenen weiter nach unten verdrängen. Diese Trennung wird praktisch vollständig, wenn man nach dem Durchgange der Farbstofflösung durch die adsorbierende Säule einen Strom des reinen Lösungsmittels herstellt. Wie die Lichtstrahlen im Spektrum, so werden in der Calciumkarbonatsäule die verschiedenen Komponenten eines Farbstoffgemisches gesetzmässig auseindergelegt, und lassen sich darin qualitativ und auch quantitativ bestimmen. Ein solches Präparat nenne ich ein Chromatogramm und die entsprechende Methode, die chromatographische Methode." Traducció : Si es filtra una solució de clorofil·la en èter de petroli a través d'una columna d'un adsorbent (utilitzo principalment carbonat de calci, que està fermament comprimit en tubs de vidre estrets), els pigments es dispersen, segons la sèrie d'adsorció, de dalt a baix a zones de colors diferents, pels pigments més fortament adsorbits que es desplacen més a baix els més dèbilment retinguts. Aquesta separació és pràcticament completa quan s'estableix un flux de dissolvent pur darrere del pas de la solució de pigment a través de la columna adsorbent. Igual que els raigs de llum d'un espectre, els diferents components d'una barreja de pigments es dispersen a la columna de carbonat de calci seguint un patró fixat i es poden determinar tant qualitativament com quantitativament. Anomeno tal preparació un "cromatograma" i el mètode corresponent, el "mètode cromatogràfic".
Livengood, Jonathan «Why was M. S. Tswett's chromatographic adsorption analysis rejected?». Studies in History and Philosophy of Science Part A, 40, 2009, pàg. 57–69. DOI: 10.1016/j.shpsa.2008.12.003.
Willstätter, Richard and Stoll, Arthur «Untersuchungen über Chlorophyll: XIX. Über die Chlorophyllid». Annalen der Chemie, 387, 3, 1912, pàg. 317–386. DOI: 10.1002/jlac.19123870304.On pages 323–324, Willstätter and Stoll state their objections to Tsvet's chromatographic methods: "Die chromatographische Adsorptionsanalyse, die in den Händen von M. Tswett¹) zu wichtigen Resultaten hinsichtlich des Chlorophylls und seiner Derivate geführt hat, halten wir für die Arbeit in größerem Maßstab, also für präparative Zwecke nicht für brauchbar. Die freien Chlorophyllide sind zu unbeständig ; ihre Farbe schlägt leicht in braun um, wenn sie von Adsorbentien aufgenommen werden. Aber selbst die Methylchlorophyllide sind zu empfindlich, so daß es noch weiter Verbesserungen²) des Tswettschen Verfahrens bedarf, um sie nach diesem wieder unverändert zu isolieren. Beim Adsorbieren mit Calciumcarbonat und beim Ausziehen mit Alkohol unterliegen alle Chlorophyllide, wie wir in unseren letzten Arbeiten beschreiben haben¹), leicht der Umwandlung, die sich bei der Verseifung mit Alkalien durch Auftreten schwach basischer Phytochlorine und Phytorhodine verrät. Es ist noch nicht bekannt, ob bei der Tswettschen Adsorptionsanalyse in kleinem Maßstab diese Veränderung der Magnesiumverbindungen vermieden worden ist."
(L'anàlisi de l'adsorció cromatogràfica, que a mans de M. Tsvet ha donat lloc a importants resultats quant a la clorofil·la i els seus derivats, considerem que no són adequats per treballar a gran escala, per tant, amb finalitats preparatives. Els clorofilids lliures són massa inestables; els seus colors es tornen fàcilment marrons quan s'absorben. Però fins i tot els metilclorofilids són massa sensibles, per la qual cosa calen encara altres millores en el mètode de Tsvet per a aïllar-les sense modificar aquest mètode. Durant l'adsorció per carbonat de calci i durant l'extracció amb alcohol, tots els clorofíl·lids sucumbeixen, tal com hem descrit en els nostres últims articles, de forma fàcil a la transformació, que es tradueix durant la hidròlisi amb àlcalis per l'aparició de fitoclorats i fitoproteics dèbilment bàsics. Encara no se sap si en el cas de l'anàlisi d'adsorció de Tsvet ([que funciona] a petita escala), s'ha evitat aquest canvi de compostos de magnesi.)
Kuhn, Richard; Winterstein, Alfred and Lederer, Edgar «Zur Kenntnis der Xanthophylle». Zeitschrift für Physiologische Chemie, 197, 1–4, 1931, pàg. 141–160. DOI: 10.1515/bchm2.1931.197.1-4.141.
Kuhn, R. and Lederer, E. «Zerlegung des Carotins in seine Komponenten. (Über das Vitamin des Wachstums, I. Mitteil)». Berichte der Deutschen Chemischen Gesellschaft, 64, 6, 10-06-1931, pàg. 1349–1357. DOI: 10.1002/cber.19310640624.
Kuhn, Richard and Lederer, Edgar «Über α- und β-carotin». Zeitschrift für Physiologische Chemie, 200, 4–6, 1931, pàg. 246–254. DOI: 10.1515/bchm2.1931.200.4-6.246.
Tswett, M. «Physikalisch-chemische Studien über das Chlorophyll. Die Adsorptionen». Berichte der Deutschen Botanischen Gesellschaft, 24, 1906, pàg. 316–323. DOI: 10.1111/j.1438-8677.1906.tb06524.x.. On page 322, Tsvet coins the term "chromatography":
Original : "Wird eine petrolätherishe Chlorophyllösung durch eine Säule eines Adsorptionsmittels durchfiltriert (ich verwende hauptsächlich Calciumcarbonate, welches in engen Glasröhren dicht gestampft wird), so werden die Farbstoffe gemäss der Adsorptionsreihe von oben nach unten in verschieden gefärbten Zonen auseinandergelegt, indem die stärker adsorbierten Farbstoffe die schwächer zurückgehaltenen weiter nach unten verdrängen. Diese Trennung wird praktisch vollständig, wenn man nach dem Durchgange der Farbstofflösung durch die adsorbierende Säule einen Strom des reinen Lösungsmittels herstellt. Wie die Lichtstrahlen im Spektrum, so werden in der Calciumkarbonatsäule die verschiedenen Komponenten eines Farbstoffgemisches gesetzmässig auseindergelegt, und lassen sich darin qualitativ und auch quantitativ bestimmen. Ein solches Präparat nenne ich ein Chromatogramm und die entsprechende Methode, die chromatographische Methode." Traducció : Si es filtra una solució de clorofil·la en èter de petroli a través d'una columna d'un adsorbent (utilitzo principalment carbonat de calci, que està fermament comprimit en tubs de vidre estrets), els pigments es dispersen, segons la sèrie d'adsorció, de dalt a baix a zones de colors diferents, pels pigments més fortament adsorbits que es desplacen més a baix els més dèbilment retinguts. Aquesta separació és pràcticament completa quan s'estableix un flux de dissolvent pur darrere del pas de la solució de pigment a través de la columna adsorbent. Igual que els raigs de llum d'un espectre, els diferents components d'una barreja de pigments es dispersen a la columna de carbonat de calci seguint un patró fixat i es poden determinar tant qualitativament com quantitativament. Anomeno tal preparació un "cromatograma" i el mètode corresponent, el "mètode cromatogràfic".
Willstätter, Richard and Stoll, Arthur «Untersuchungen über Chlorophyll: XIX. Über die Chlorophyllid». Annalen der Chemie, 387, 3, 1912, pàg. 317–386. DOI: 10.1002/jlac.19123870304.On pages 323–324, Willstätter and Stoll state their objections to Tsvet's chromatographic methods: "Die chromatographische Adsorptionsanalyse, die in den Händen von M. Tswett¹) zu wichtigen Resultaten hinsichtlich des Chlorophylls und seiner Derivate geführt hat, halten wir für die Arbeit in größerem Maßstab, also für präparative Zwecke nicht für brauchbar. Die freien Chlorophyllide sind zu unbeständig ; ihre Farbe schlägt leicht in braun um, wenn sie von Adsorbentien aufgenommen werden. Aber selbst die Methylchlorophyllide sind zu empfindlich, so daß es noch weiter Verbesserungen²) des Tswettschen Verfahrens bedarf, um sie nach diesem wieder unverändert zu isolieren. Beim Adsorbieren mit Calciumcarbonat und beim Ausziehen mit Alkohol unterliegen alle Chlorophyllide, wie wir in unseren letzten Arbeiten beschreiben haben¹), leicht der Umwandlung, die sich bei der Verseifung mit Alkalien durch Auftreten schwach basischer Phytochlorine und Phytorhodine verrät. Es ist noch nicht bekannt, ob bei der Tswettschen Adsorptionsanalyse in kleinem Maßstab diese Veränderung der Magnesiumverbindungen vermieden worden ist."
(L'anàlisi de l'adsorció cromatogràfica, que a mans de M. Tsvet ha donat lloc a importants resultats quant a la clorofil·la i els seus derivats, considerem que no són adequats per treballar a gran escala, per tant, amb finalitats preparatives. Els clorofilids lliures són massa inestables; els seus colors es tornen fàcilment marrons quan s'absorben. Però fins i tot els metilclorofilids són massa sensibles, per la qual cosa calen encara altres millores en el mètode de Tsvet per a aïllar-les sense modificar aquest mètode. Durant l'adsorció per carbonat de calci i durant l'extracció amb alcohol, tots els clorofíl·lids sucumbeixen, tal com hem descrit en els nostres últims articles, de forma fàcil a la transformació, que es tradueix durant la hidròlisi amb àlcalis per l'aparició de fitoclorats i fitoproteics dèbilment bàsics. Encara no se sap si en el cas de l'anàlisi d'adsorció de Tsvet ([que funciona] a petita escala), s'ha evitat aquest canvi de compostos de magnesi.)
nih.gov
ncbi.nlm.nih.gov
Martin, A. J. and Synge, R.L. «A new form of chromatography employing two liquid phases». Biochemical Journal, 35, 12, 1941, pàg. 1358–1368. PMC: 1265645. PMID: 16747422.
